高產(chǎn)酸菌株的篩選、鑒定及其混菌發(fā)酵對(duì)菜籽粕營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的影響
摘要：本實(shí)驗(yàn)從泡菜水中分離得到一株高產(chǎn)有機(jī)酸的乳桿菌，并將該菌株與黑曲霉混合后結(jié)合兩步法處理菜籽粕，同時(shí)降解菜籽粕中的硫苷和大分子蛋白并提高總酸含量，從而提高菜籽粕的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。該株乳桿菌經(jīng)16S rDNA鑒定，確定為類食品乳桿菌(Lactobacillus paralimentarius)。將該菌株與黑曲霉混合后結(jié)合兩步法處理菜籽粕后，其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值得到了一定提高，與空白對(duì)照和單菌發(fā)酵相比，總酸含量分別提高了640.54%、160.95%和112.40%;酸溶蛋白和氨基酸態(tài)含量分別從2.87%和 0.12%提高到19.08%和1.23%;硫苷含量從23.09μmol/g下降到12.65μmol/g。結(jié)果表明，混菌發(fā)酵結(jié)合兩步法有利于改善菜籽粕的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，對(duì)擴(kuò)大菜籽粕的利用奠定了基礎(chǔ)。
菜籽粕是菜籽經(jīng)榨油后的副產(chǎn)物，其粗蛋白含量為35%～42%，碳水化合物含量為20%～25%，粗纖維含量為12%～13%，且氨基酸組成平衡，是一種優(yōu)質(zhì)的植物蛋白資源，近年來常被作于制備多肽及作為動(dòng)物日糧。由于其中含有硫苷、植酸等抗?fàn)I養(yǎng)因子，限制了其在食品、動(dòng)物日糧中的應(yīng)用價(jià)值。為提高菜籽粕應(yīng)用價(jià)值，國(guó)內(nèi)外學(xué)者已對(duì)其抗?fàn)I養(yǎng)因子的降解進(jìn)行了大量研究，如物理法、化學(xué)法、酶法、微生物發(fā)酵法等。因微生物發(fā)酵法相比于物理、化學(xué)、酶法具有成本低、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失少、發(fā)酵降解抗?fàn)I養(yǎng)因子的同時(shí)能提高蛋白營(yíng)養(yǎng)價(jià)值等優(yōu)點(diǎn)而受到廣泛關(guān)注。近年來，大量研究中常用到乳酸菌、曲霉、枯草芽孢桿菌等進(jìn)行固態(tài)發(fā)酵降解菜籽粕抗?fàn)I養(yǎng)提高小肽含量。吳正可等通過嗜酸乳桿菌發(fā)酵菜籽粕后，將總酸從1.01%提高至3.10%，硫苷從37.48μmol/g降至28.60μmol/g，有效改善了其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。Shi等研究結(jié)果表明通過黑曲霉發(fā)酵菜籽粕72h后，將菜籽粕中硫苷從41.91μmol/g降低至23.86μmol/g，小肽含量從2.57%提高至8.39%，但并不能提高酸度改善風(fēng)味。
雖然將乳酸菌應(yīng)用于菜籽粕發(fā)酵能提高菜籽粕總酸含量和改善其風(fēng)味，但對(duì)于降解硫苷、大分子蛋白的能力有限。鑒于黑曲霉在發(fā)酵的過程中能產(chǎn)生多種酶系，對(duì)降解抗?fàn)I養(yǎng)因子及分解大分子蛋白效果顯著。因此，在本研究中，將乳酸菌和黑曲霉混菌發(fā)酵同時(shí)結(jié)合兩步法進(jìn)一步降解菜籽粕中的抗?fàn)I養(yǎng)因子和分解大分子蛋白，以達(dá)到改善菜籽粕營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的目的，擴(kuò)大菜籽粕的應(yīng)用范圍。
1 材料與方法
1.1 材料與儀器
黑曲霉：中國(guó)工業(yè)菌種保藏中心(CICC);
乳桿菌：泡菜水中分離;
泡菜水：三種市售泡菜水;
菜籽粕、麩皮：樂山恒峰華邦科技有限公司;
LBS 培養(yǎng)基：北京某生物技術(shù)有限責(zé)任公司;
過氧化氫酶試劑盒：上海某生物科技有限公司;
細(xì)菌 DNA 提取試劑盒：杭州新景生物試劑開發(fā)有限公司;
其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純：成都市科隆化學(xué)品有限公司。
SW-CJ-2D：雙人單面凈化工作臺(tái)蘇州凈化設(shè)備有限公司;
K9840 自動(dòng)凱氏定氮儀：山東海能科學(xué)儀器有限公司;
AT-710 電位自動(dòng)滴定計(jì)：KyotoElectronicsMFG公司;
BCD-571WDPF 冰箱：海爾集團(tuán)電器產(chǎn)業(yè)有限公司;
T－114 型分析天平：北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司;
T6 紫外-可見分光光度計(jì)：北京普析通用儀器有限公司;
QYC－2102C 型恒溫培養(yǎng)搖床：上海福馬實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司;
MF80BSH-2型霉菌培養(yǎng)箱：上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司;
LS-75HD 立式高壓蒸汽滅菌器：江陰濱江醫(yī)療設(shè)備有限公司。
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
1.2.1 培養(yǎng)基的配置
MRS液體培養(yǎng)基:蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母粉5g，葡萄糖5g，乙酸鈉5 g，檸檬酸二銨2g，Tween－80 1g，K2HPO4 2g，MgSO4·7H2O 0.2g，MnSO4·H2O 0.05g，去離子水1.0L，pH6.8，121℃滅菌15min。
MRS瓊脂培養(yǎng)基:同MRS液體培養(yǎng)基，向其中添加20g瓊脂，121℃滅菌15 min。
黑曲霉菌麩皮種子培養(yǎng)基:麩皮∶水=2∶1(W/V)，混勻后取30g裝入500mL三角瓶，121℃滅菌15min。
菜籽粕發(fā)酵培養(yǎng)基:菜籽粕∶麩皮=72∶28(W/W)，添加含0.12%吐溫溶液，使其水分含量為58%(W/W)，混勻后取60g裝入500mL三角瓶，121℃滅菌15min。
1.2.2 高產(chǎn)酸乳桿菌分離篩選
初篩:將泡菜水中分離得到的76株乳桿菌分別于LBS培養(yǎng)基劃線，并于37℃培養(yǎng)3d，挑取生長(zhǎng)快，單菌落為灰白色，直徑在0.5～0.25mm的菌株進(jìn)行過氧化氫酶接觸試驗(yàn)，對(duì)酶接觸試驗(yàn)呈陰性的菌株進(jìn)行復(fù)篩。
復(fù)篩:將初篩獲得的菌株接種于MRS培養(yǎng)基中，37℃培養(yǎng)18h。培養(yǎng)后，按1%接種量接種于菜籽粕發(fā)酵培養(yǎng)基，混勻，裝入自封袋并排出空氣，37℃厭氧發(fā)酵24h，發(fā)酵結(jié)束后測(cè)定總酸，選擇發(fā)酵菜籽粕產(chǎn)酸優(yōu)勢(shì)乳桿菌，以接種無菌MRS 培養(yǎng)基替代乳桿菌種子液做空白對(duì)照。
1.2.3 菌株鑒定
通過細(xì)菌DNA提取試劑盒法提取優(yōu)勢(shì)菌株基因組后，用細(xì)菌16S rDNA通用引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增。PCR反應(yīng)條件為:預(yù)變性:98℃，5min;變性:98℃，10s;退火:55℃，15s，延伸:72℃，20s;循環(huán)數(shù):35;終延伸:72℃，5min。將PCR擴(kuò)展產(chǎn)物送至成都擎科梓熙生物技術(shù)有限公司進(jìn)行測(cè)序。將測(cè)序序列與GenBank核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行BLAST同源性對(duì)比分析，運(yùn)用Mega 7.0構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹，確定所選菌株種屬。
1.2.4 菌株生長(zhǎng)曲線
將保藏于斜面的乳桿菌接種于MRS液體培養(yǎng)基中并于37℃培養(yǎng)12h后，按1%接種量(V/V)接種于250mLMRS培養(yǎng)基中，37℃靜置培養(yǎng)36h，每隔3h取樣1次，于600nm處測(cè)定OD值，確定菌體濃度。
1.2.5 乳桿菌發(fā)酵溫度對(duì)產(chǎn)酸的影響
將篩選得到的乳桿菌按1.2.2中復(fù)篩的方法接種發(fā)酵菜籽粕，探討不同發(fā)酵溫度(35、36、37、38、39、40、41、42和43℃)對(duì)乳桿菌發(fā)酵菜籽粕產(chǎn)酸的影響。
1.2.6 混菌發(fā)酵結(jié)合兩步法對(duì)發(fā)酵菜籽粕產(chǎn)酸的影響
黑曲霉麩曲種子:將斜面保藏的黑曲霉用接種環(huán)勾取3環(huán)接種于種子培養(yǎng)基中，30℃恒溫培養(yǎng)72h;乳桿菌發(fā)酵種子液:將復(fù)篩的乳桿菌按1%接種量(V/V)接種于MRS液體培養(yǎng)基中，于37℃下，按1.2.4中確定的最佳培養(yǎng)時(shí)間培養(yǎng)。
兩步法—發(fā)酵:將黑曲霉麩曲種子按3%(W/W)接種量接種于菜籽粕發(fā)酵培養(yǎng)基中，混勻，28℃發(fā)酵48h;發(fā)酵結(jié)束后，將發(fā)酵后的菜籽粕裝入自封袋中，按1%接種量(V/W)接種乳桿菌種子液，混勻并排出自封袋空氣后于1.2.5中確定的最佳溫度下發(fā)酵，于不同發(fā)酵時(shí)間下測(cè)得總酸和還原糖含量。
兩步法—酶解:操作與兩步法步驟相同，僅用接種無菌水替換接種乳桿菌，于 1.2.5中確定的最佳溫度下對(duì)發(fā)酵菜籽粕進(jìn)行酶解處理，于不同酶解時(shí)間下測(cè)定總酸和還原糖含量。
乳桿菌發(fā)酵:于菜籽粕發(fā)酵培養(yǎng)基中接種1%乳桿菌種子液(V/W)并于1.2.5 中確定的最佳溫度下進(jìn)行發(fā)酵，于不同發(fā)酵時(shí)間下測(cè)定總酸含量。
空白對(duì)照:以未接種黑曲霉和乳桿菌進(jìn)行兩步法處理或未接種乳桿菌、黑曲霉進(jìn)行單菌發(fā)酵的菜籽粕為空白對(duì)照。
1.2.7 混菌發(fā)酵結(jié)合兩步法對(duì)發(fā)酵菜籽粕過程中硫苷、酸溶蛋白、氨基酸態(tài)氮含量變化
按1.2.6中兩步發(fā)酵方式對(duì)菜籽粕進(jìn)行發(fā)酵，測(cè)定發(fā)酵過程中硫苷、酸溶蛋白、氨基酸態(tài)氮含量變化，同時(shí)對(duì)酶解過程中硫苷含量進(jìn)行測(cè)定，確定兩步發(fā)酵對(duì)硫苷降解的影響。
1.2.8 指標(biāo)的測(cè)定
總酸:根據(jù)GB/T 12456－2008測(cè)定，結(jié)果以乳酸計(jì)。
還原糖:采用DNS法測(cè)定。
酸溶蛋白:參考GB/T 22492－2008測(cè)定。
氨基酸態(tài)氮:根據(jù)GB 5009.235－2016測(cè)定。
1.3 數(shù)據(jù)處理
每次試驗(yàn)設(shè)置三個(gè)平行，試驗(yàn)結(jié)果采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差表示，使用SPSS 22.0進(jìn)行單因素方差分析，并采用Duncan 檢驗(yàn)法進(jìn)行多重比較，以P＜0.05作為差異性顯著判斷標(biāo)準(zhǔn)。
2 結(jié)果與分析
2.1 高產(chǎn)酸的乳桿菌初篩與復(fù)篩
通過LBS乳桿菌選擇培養(yǎng)基篩選出了34株長(zhǎng)勢(shì)良好且過氧化氫酶接觸試驗(yàn)呈陰性的菌株。通過固態(tài)發(fā)酵菜籽粕試驗(yàn)對(duì)34株菌進(jìn)行復(fù)篩，結(jié)果如圖1所示。
結(jié)果表明，相比于未添加乳桿菌發(fā)酵的空白對(duì)照，除a1和a3外，其他32株乳桿菌產(chǎn)酸能力都較好，總酸含量顯著提高(P＜0.05)。分別經(jīng)a2，a11，c5，c10，c11，c13發(fā)酵菜籽粕后，總酸含量均從0.31%提高至1%以上，尤其經(jīng)c10發(fā)酵后，總酸含量最高，達(dá)到1.24%，與空白相比提高了300%。說明乳桿菌c10在菜籽粕中生長(zhǎng)良好，且能利用菜籽粕中多種糖類發(fā)酵并產(chǎn)生大量酸性物質(zhì)，使得總酸含量大幅提高，因此選擇c10用于后續(xù)研究。
2.2 乳桿菌菌株鑒定
通過PCR對(duì)c10基因組中16S rDNA擴(kuò)增后送至擎科生物有限公司測(cè)序，將測(cè)序所得序列與NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中已收錄DNA序列進(jìn)行BLAST對(duì)比，并構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(圖2)。結(jié)果表明，c10為乳桿菌屬，與類食品乳桿菌( Lactobacillusparalimentarius DSM 13238)的相似性達(dá)99.37%，因此確定c10為類食品乳桿菌。
2.3 乳桿菌生長(zhǎng)曲線
圖3為類食品乳桿菌生長(zhǎng)曲線。結(jié)果表明，0～3h為生長(zhǎng)延滯期，3h后，進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，菌體濃度迅速增加。到12h后，可能進(jìn)入對(duì)數(shù)末期，菌體濃度緩慢增加。為保證接種的乳桿菌處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，在后續(xù)試驗(yàn)中，均選擇培養(yǎng)12h的處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的菌種活化液作為發(fā)酵菜籽粕種子液。
2.4 溫度對(duì)類食品乳桿菌發(fā)酵菜籽粕產(chǎn)酸的影響
圖4為類食品乳桿菌于不同溫度下發(fā)酵24h后菜籽粕中總酸含量變化情況。結(jié)果表明，37～40℃為發(fā)酵菜籽粕產(chǎn)酸的最佳溫度，當(dāng)發(fā)酵溫度低于37℃或高于40℃時(shí)，總酸含量顯著降低(P＜0.05)。可能由于溫度過低或過高，乳桿菌生長(zhǎng)代謝、胞內(nèi)外酶活性受到抑制，從而影響產(chǎn)酸的相關(guān)代謝途徑，導(dǎo)致發(fā)酵后菜籽粕中總酸含量較低。
由于黑曲霉在發(fā)酵菜籽粕過程中能產(chǎn)生蛋白酶、纖維素酶等，發(fā)酵結(jié)束后進(jìn)一步提高溫度進(jìn)行酶解，可將菜籽粕中大分子營(yíng)養(yǎng)物降解為小分子營(yíng)養(yǎng)物。因此在第二步厭氧發(fā)酵(乳桿菌發(fā)酵)過程中，適當(dāng)提高環(huán)境溫度將有利于提高蛋白酶、纖維素酶活性，為乳桿菌提供大量可發(fā)酵碳氮源，促進(jìn)乳桿菌發(fā)酵菜籽粕產(chǎn)酸，同時(shí)利于蛋白酶將菜籽粕中大分子蛋白分解為小肽。由于39℃利于乳桿菌發(fā)酵產(chǎn)酸，且與蛋白酶作用溫度接近，因此將39℃作為第二步乳桿菌發(fā)酵溫度。
2.5 混菌發(fā)酵結(jié)合兩步法對(duì)發(fā)酵菜籽粕總酸含量的影響
如圖5A所示，經(jīng)黑曲霉發(fā)酵后，總酸含量從0.37%提高至1.05%。由于黑曲霉可利用多種碳源發(fā)酵產(chǎn)生檸檬酸等有機(jī)酸，因此，在第一步黑曲霉有氧發(fā)酵中，菜籽粕中部分糖類被黑曲霉轉(zhuǎn)化為有機(jī)酸，使得發(fā)酵后菜籽粕總酸含量提高。將黑曲霉發(fā)酵后的菜籽粕接種類食品乳桿菌進(jìn)行厭氧發(fā)酵后，總酸含量進(jìn)一步提高。厭氧發(fā)酵至3h時(shí)，總酸含量變化較小，發(fā)酵3h后，總酸含量被顯著提高，當(dāng)發(fā)酵至12h后，總酸含量無顯著變化(P＜0.05)。當(dāng)兩步法發(fā)酵至12h時(shí)，總酸含量達(dá)到2.74%，與黑曲霉單菌發(fā)酵和空白對(duì)照比較可知，其總酸含量分別提高160.95%和640.54%。將黑曲霉發(fā)酵后的菜籽粕進(jìn)行酶解后，總酸含量無顯著性差異(P＞0.05)，表明在酶解過程中，黑曲霉發(fā)酵產(chǎn)生的酶不影響總酸含量，且在第二步乳桿菌厭氧發(fā)酵過程中，總酸含量的變化主要由乳桿菌發(fā)酵糖類產(chǎn)生有機(jī)酸引起。
圖5B為兩步法過程中的還原糖含量的變化情況。結(jié)果表明，發(fā)酵菜籽粕于39℃下進(jìn)行酶解后，還原糖含量明顯增加。當(dāng)酶解至12h時(shí)，菜籽粕中還原糖含量達(dá)到30.09mg/g，相比于黑曲霉有氧發(fā)酵結(jié)束后，還原糖含量提高了272.86%，延長(zhǎng)酶解時(shí)間，還原糖含量無顯著差異(P＞0.05)。當(dāng)菜籽粕經(jīng)黑曲霉發(fā)酵后，仍有大量多糖未被降解，這些物質(zhì)在酶解階段能被黑曲霉發(fā)酵產(chǎn)生的多糖水解酶水解，因此使得菜籽粕中還原糖含量明顯增加。當(dāng)接種類食品乳桿菌進(jìn)行厭氧發(fā)酵至12h后，還原糖含量為17.94mg/g，相比39℃酶解12h，還原糖含量下降了40.38%。在添加乳桿菌進(jìn)行厭氧發(fā)酵過程中，酶將多糖分解為還原糖的同時(shí)，乳桿菌利用這些還原糖發(fā)酵產(chǎn)生有機(jī)酸，因此相比酶解菜籽粕中，還原糖含量大幅下降，并且總酸含量明顯提高。
如圖5C所示，經(jīng)類食品乳桿菌單獨(dú)發(fā)酵菜籽粕24h，總酸含量提高至1.29%，延長(zhǎng)發(fā)酵時(shí)間，總酸含量無顯著差異(P＞0.05)。兩步法縮短了乳桿菌發(fā)酵菜籽粕達(dá)到最大產(chǎn)酸量的時(shí)間，且相比類食品乳桿菌單獨(dú)發(fā)酵菜籽粕總酸含量提高了 112.40%。可能的原因是，在兩步發(fā)酵過程中，多種酶將菜籽粕中多種大分子物質(zhì)分解為小分子物質(zhì)，乳桿菌可利用的小分子營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不斷增多，加快了其生長(zhǎng)代謝速率，因此縮短了產(chǎn)酸時(shí)間，同時(shí)在此過程中還原糖含量不斷增加，經(jīng)乳桿菌發(fā)酵后，總酸含量進(jìn)一步提高。
2.6 混菌發(fā)酵結(jié)合兩步法對(duì)硫苷含量的影響
黑曲霉在發(fā)酵48h后進(jìn)入酶解階段，結(jié)果如表1所示，將黑曲霉發(fā)酵后的菜籽粕于39℃酶解后，硫苷含量明顯降低，經(jīng)酶解12h后，硫苷含量降低為13.29 μmol/g，隨著酶解時(shí)間的延長(zhǎng)，其含量無顯著變化(P＞0.05)。此結(jié)果與黑曲霉一步發(fā)酵后接種乳桿菌于39℃發(fā)酵12h后的硫苷含量無顯著差異(P＞0.05)，表明類食品乳桿菌在第二步厭氧發(fā)酵產(chǎn)酸過程中的相關(guān)代謝活動(dòng)不會(huì)對(duì)黑曲霉分泌的相關(guān)酶系分解硫苷產(chǎn)生影響。當(dāng)兩步發(fā)酵菜籽粕至12h后，硫苷、總酸含量均無顯著變化(P＞0.05)，因此在后續(xù)試驗(yàn)中僅關(guān)注兩步發(fā)酵12h后菜籽粕中酸溶蛋白及氨基酸態(tài)氮含量變化，確定兩步發(fā)酵的最佳發(fā)酵時(shí)間。
2.7 混菌發(fā)酵結(jié)合兩步法對(duì)酸溶蛋白和氨基酸態(tài)氮含量的影響
表2為混菌發(fā)酵結(jié)合兩步法對(duì)酸溶蛋白和氨基酸態(tài)氮含量的影響。結(jié)果2.5表明，經(jīng)兩步發(fā)酵12h后，總酸含量不再隨發(fā)酵時(shí)間延長(zhǎng)而變化，但酸溶蛋白、氨基酸態(tài)氮含量均隨發(fā)酵時(shí)間延長(zhǎng)而增加。當(dāng)發(fā)酵至18h后，酸溶蛋白及氨基酸態(tài)氮含量分別提高至19.08%和1.23%，且不隨發(fā)酵時(shí)間延長(zhǎng)而改變(P＞0.05)，相比黑曲霉單步發(fā)酵后分別提高78.48%和68.27%。因此確定兩步發(fā)酵的最佳發(fā)酵時(shí)間為18h。之前的研究表明，將黑曲霉發(fā)酵后的菜籽粕進(jìn)一步酶解后，由于菜籽粕中大分子蛋白被黑曲霉發(fā)酵產(chǎn)生的相關(guān)蛋白酶分解，將大幅度提高菜籽粕中小分子蛋白含量。因此，在本研究中，將發(fā)酵的菜籽粕接種乳桿菌進(jìn)行兩步發(fā)酵后，總酸含量被提高的同時(shí)酸溶蛋白及氨基酸態(tài)氮含量也被大幅提高。
3 結(jié)論
本實(shí)驗(yàn)從泡菜水中篩選出一株高產(chǎn)有機(jī)酸的乳桿菌，經(jīng)16S rDNA測(cè)序鑒定為類食品乳桿菌(Lactobacillus paralimentarius)，并確定其發(fā)酵菜籽粕產(chǎn)酸的最佳條件。將乳酸菌與黑曲霉混合發(fā)酵同時(shí)結(jié)合兩步法作用于菜籽粕后，與空白對(duì)照和單菌發(fā)酵相比，其總酸含量分別提高了640.54%、160.95%和112.40%;酸溶蛋白和氨基酸態(tài)氮含量分別從2.87%和0.12%提高到19.08%和1.23%，其提高率達(dá)到了564.81%和925%;硫苷含量從23.09μmol/g下降到12.65μmol/g，其降解率為45.21%。以上結(jié)果表明，菜籽粕先經(jīng)黑曲霉發(fā)酵產(chǎn)酶再接種乳桿菌兩步法處理后，硫苷含量顯著下降，菜籽粕的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值顯著提高，其品質(zhì)得到了很大的改善，對(duì)擴(kuò)大菜籽粕在食品和飼料中的開發(fā)與利用具有實(shí)際意義。
發(fā)酵完成的棉菜粕飼喂動(dòng)物技術(shù)
需要注意的是，發(fā)酵后的飼料酸度較低，不可以取代禽畜全部日糧。其他類發(fā)酵飼料同理。飼喂時(shí)根據(jù)不同情況，將發(fā)酵飼料按照一定比例添加到日糧中，發(fā)酵完成的棉菜粕為濕料，具體使用量每大概1.5-2公斤發(fā)酵棉菜粕（濕料）代替動(dòng)物日糧配方中1公斤豆粕的使用量進(jìn)行代替使用，與其它飼料混合后直接飼喂，由于棉菜籽粕蛋白較高，最高使用量不要超過禽畜日糧飼喂量的40%（濕料重量）。如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵飼料過酸適口性變差，可在飼喂前在陽(yáng)光下曬1-2小時(shí)，或添加適量的碳酸氫鈉（小蘇打）即可改善。
發(fā)酵過程中與發(fā)酵后使用過程中，發(fā)酵的容器要一直保持密封狀態(tài)，可以長(zhǎng)時(shí)間保存（一年左右）。
當(dāng)前養(yǎng)殖業(yè)成本高居不下，而飼料成本是其中最高的，利用廉價(jià)原料發(fā)酵飼料（包括一些輕度發(fā)霉的粕類低價(jià)收回）是極佳解決辦法。通過微生物飼料發(fā)酵劑的發(fā)酵作用，可以將輕度霉變飼料變成優(yōu)質(zhì)飼料，將不易消化的物質(zhì)分解為可被畜禽吸收的小分子糖類、氨基酸等。同時(shí)發(fā)酵飼料中富含有益微生物、酶制劑、酸化劑等，可調(diào)節(jié)畜禽腸胃微生態(tài)環(huán)境并進(jìn)一步提高飼料利用率。發(fā)酵飼料氣味清香，提高了飼料的適口性，加上發(fā)酵飼料中有大約4℃的酒度，能夠促進(jìn)動(dòng)物新陳代謝促進(jìn)健康抵御疾病，是當(dāng)前養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展中重要的一環(huán)。
本技術(shù)也可以同樣發(fā)酵菜籽粕（餅）、棕櫚粕等，方法同上。
【視頻】部分發(fā)酵飼料養(yǎng)豬雞鴨帶給你無臭味健康無抗養(yǎng)殖效果
相關(guān)鏈接：99多功能飼料發(fā)酵劑——高濃度乳酸菌為主的固態(tài)飼料發(fā)酵劑，更輕易成功、效果更好的生物飼料發(fā)酵劑，簡(jiǎn)單好用的中草藥發(fā)酵劑
廣西助農(nóng)畜牧科技有限公司提供全方位支撐
2020年已全面禁抗，我們之前經(jīng)常在飼料中添加的抗生素進(jìn)行促生長(zhǎng)行為將是違法，否則面臨巨額罰單。如何既能夠促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)又能夠形成無抗養(yǎng)殖呢？其實(shí)中草藥在促進(jìn)畜禽養(yǎng)殖健康和生長(zhǎng)、改善肉蛋奶品質(zhì)大有可為，特別是將中草藥發(fā)酵后效果提升4-28倍等好處，這個(gè)實(shí)施方案比你想象中效果更好，運(yùn)用的沒有不被效果折服的，值得嘗試驗(yàn)證
我們的技術(shù)僅需在出欄前半個(gè)月左右運(yùn)用益生菌+酶制劑+中草藥相關(guān)的無違禁安全產(chǎn)品，肉質(zhì)改善非常顯著，且可以批量化生產(chǎn)。
目前我們已經(jīng)有了成熟的技術(shù)、產(chǎn)品和運(yùn)用方案，且有大量成功案例，可以在短時(shí)間、批量化、安全無違禁地為您的養(yǎng)殖場(chǎng)生產(chǎn)出高品質(zhì)的家畜、家禽、水產(chǎn)產(chǎn)品。
規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)養(yǎng)殖公司我們提供產(chǎn)品樣品、驗(yàn)證效果和通過檢測(cè)后您再放心地規(guī)模化運(yùn)用。
微信公眾號(hào)：gxzn-99
微信號(hào)：gxzn07713815862
電話：0771-2204816，3800156,3815862
網(wǎng)站：www.fsssmj.com， www.zn99.com
微店：weidian.com/?userid=1353707843
產(chǎn)品購(gòu)買微信轉(zhuǎn)賬請(qǐng)?zhí)砑?8076549930或15578100088為好友（還可以咨詢技術(shù)與業(yè)務(wù)問題）
- 上一篇：廣東江門市一個(gè)自繁自養(yǎng)豬場(chǎng)采用在飼料中添加御瘟湯+多功能活菌肽成功防控非洲豬瘟 [2021-05-30]
- 下一篇：雞虱子的防治技術(shù) [2021-05-28]
